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阿尔茨海默病(AD)大鼠模型构建
发布日期:2021-10-28
浏览次数:160

原型物种:人

来源:物理方法和药物

模式动物品系:SPF级SD大鼠,健康,雄性,体重为250g-300g。

实验分组:实验分六组:正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。

实验周期:4-6 weeks

建模方法

模型建立:SD大鼠均采用1%戊巴比妥钠40μg/g腹腔内注射麻醉,麻醉后继而固定于脑立体定位仪上。按照大鼠脑立体定位图谱,以前囟为零起点,前囟后3.5 mm处为穿刺点,中线右侧旁开2mm,而后牙科钻钻开颅骨,采用微量注射器自脑表面垂直进针3mm,即:(AP= -3.5 mm, ML=2.0 mm, DV=3.0 mm),双侧海马CA1区缓慢匀速注射Aβ1-40各10 μg (1 μL),留针5 min,退针后缝合伤口。造模后3d后,开始尾静脉注射,注射生理盐水,大鼠每只给药100μl/次/d,连续给药21d后,进行水迷宫行为学检测。

应用:疾病模型用于阿尔兹海默症的药物研发

动物实验1.jpg

模型评价

1.神经功能缺失体征评分

参考Longa及Bederson的5分制法在动物麻醉清醒后24h进行评分,分值越高,说明动物行为障碍越严重。

0分:无神经损伤症状

1分:不能完全伸展对侧前爪

2分:向对侧转圈

3分:向对侧倾倒

4分:不能自发行走,意识丧失

2.TTC染色

麻醉小鼠后,取小鼠脑组织,放入-20℃冰箱冷冻30min。用PBS配置1% TTC(W/V),37℃水浴至TTC溶解,将冻好的脑组织切片,置于10ml TTC溶液中,37℃恒温孵育10min。不时翻动脑片,使组织均匀染色。正常脑组织染色后呈鲜红色,而梗死区呈苍白色。

组织病理学

取脑后用4%多聚甲醛溶液固定,蔗糖溶液脱水后,经OCT包埋做冰冻切片,切片10um,做尼氏染色,可做梗死面积的评价。

尼氏体(Nissl body):是胞质内的一种嗜碱性物质,广泛见于各种神经元,但其形状大小和数量则各有差异。在生理情况下,尼氏体大而数量多,反映神经细胞合成蛋白质的功能较强,在神经元受损时,尼氏体的数量可减少甚至消失。

统计学分析

应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显著差异。

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