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蛋白质质谱鉴定

菲优特检测依托青岛市生物技术药物公共研发平台、经验丰富的科研人员、日趋完善的技术平台,围绕蛋白工程、组学等领域建立了蛋白技术服务体系,致力于为广大科研工作者的研发项目保驾护航,为您提供价格实惠、品质优良、快速高效的技术服务。

 蛋白质质谱鉴定 · 技术概述 

质谱是将待测物质变为气态离子并将离子按质荷比(m/z)进行分离,检测各种离子谱峰的强度而实现分析的一种方法。质谱一般由离子源(Ion source)、质量分析器(Mass analyzer)和离子检测器(Detector)三部分组成,传统的质谱仅用于小分子挥发物质的分析,但随着新的离子化技术的出现,如基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)等,各种质谱技术的出现为蛋白质分析提供了一种新的且准确快速的途径。

现在蛋白质组学基本研究手段是:以生物质谱技术为核心,对蛋白质进行大规模、高通量分离、鉴定和分析。蛋白质定性通常采用质谱分析结合数据库检索的方法,所分析的样本可以是蛋白质溶液、蛋白质胶条或胶点。

简单蛋白样本,例如双向电泳斑点或纯化蛋白,通常采用MALDI-TOF/TOF质谱(MS/MS)进行分析。

混合蛋白样本,例如蛋白溶液,或SDS-PAGE条带,通常采用液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术进行分析。应用领域有:亚细胞组分的全谱分析,IP、co-IP、Pull-down后的互作蛋白鉴定,或其他中等复杂蛋白样本的鉴定。

蛋白质质朴鉴定

 蛋白质质谱鉴定 · 技术原理 

串联质谱(MS/MS)检测蛋白的原理是:蛋白先经胰酶消化成肽段,肽段在质谱仪中离子化后,会带上一定量的电荷,通过检测器分析,可得到各肽段的质荷比(m/z),从而得知各肽段的相对分子质量。为获得肽段的序列信息,质谱仪会选取某些肽段进行破碎,再次分析,获得二级质谱。用检索软件选择相应的数据库对质谱数据进行分析,同时以打分的形式评判鉴定结果,当打分大于某个阈值时,即判定质谱鉴定成功,反之则鉴定失败。

LC-MS/MS方法是将蛋白酶切消化为肽段混合物,之后这些肽段先经高效液相色谱分离形成简单的组分,再进行串联质谱(MS/MS)分析;因此适合于混合蛋白样本的鉴定。

 蛋白质质谱鉴定 · 技术特点 

高通量、自动化程度高、分离能力强;

通用性强,可分析蛋白质条带、免疫共沉淀洗脱液、组织提取液、全细胞裂解液、亚细胞分离组分等多种形式的样品。

 蛋白质质谱鉴定 · 服务流程 

蛋白样本制备  →  蛋白酶解  →  串联质谱分析(或LC-MS/MS) →  数据库检索  →  蛋白质鉴定结果

菲优特检测秉承“科学 · 独立 · 诚信 · 高效”的服务理念,以专业、专注的态度为您提供精确的检测技术和咨询服务。

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