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药物毒性检测

新的化合物可能引起各类组织器官的毒性损伤,这些毒性可以在相应的细胞模型中进行早期检测,为药物研发提供重要参考资料。

菲优特检测生物以科技服务为起点,依托青岛市生物技术药物公共研发平台、经验丰富的科研人员、日趋完善的技术平台、标准的操作流程、优质的合作平台和强大的科学家网络,为国内外科研工作者和机构提供专业的科研技术合作和转化服务指导,为客户提供全面的药物毒性检测服务。

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菲优特检测生物药物毒性检测通过高通量/高内涵毒性筛选、MTT/cck8毒性等方法检测药物毒性,包含了肝脏毒性、心脏毒性、肾毒性等。

药物毒性检测项目
肝脏毒性心脏毒性神经毒性
肾毒性基因毒性内分泌干扰
药物相互作用(DDI)

 药物毒性检测方法 

高内涵/高通量筛选:

高内涵筛选(HCS)是一套自动化分析方法,因其技术的独特性,可同时监测和分析药物对细胞多种毒性指标的影响,指示药物毒性作用机制。利用整合的显微镜、图像处理技术及可视化工具从细胞或细胞群中提取数据,这些毒性指标包括细胞数量、细胞存活率、细胞凋亡、细胞核大小及形态变化、细胞膜通透性、胞内钙离子水平、谷光甘肽(GSH)水平、氧化应激(OS)、线粒体膜电位(MMP)、细胞色素C释放等,获得定量分析结果。HCS一般应用于高通量的样品荧光成像,提供定量分析结果。此外,HCS能够结合单个细胞的多重检测结果,同时分析单次实验中的多个细胞亚群。

高通量筛选(HTS)是以微板形式作为实验工具载体,以自动化操作系统执行试验过程,同一时间检测数以千万的样品,并得到的相应数据库支持运转,具有微量、快速、灵敏、准确的特点。

MTT/CCK8检测:

MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料。活细胞在琥珀酸脱氢酶和细胞色素c的作用下四唑环开裂,生成蓝色的结晶甲瓒并沉积在细胞中,结晶甲瓒的生成量仅仅与活细胞数目成正比(死细胞中的琥珀酸脱氢酶消失,不能还原MTT)。还原生成的结晶甲瓒可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺、20%的十二甲基磺酸钠(PH 4.7)或10%酸化十二甲基磺酸钠(PH 4.7)的溶液中溶解。利用酶标仪测定490nm波长处的光密度测出OD值,即反映活细胞数目。也可利用DMSO(二甲基亚砜)来溶解。用DMSO之前要尽量去掉培养液,DMSO溶解甲月替颗粒,进行比色测定。

CCK-8(cell-counting kit-8)检测试剂盒是应用WST-8取代MTT被还原,WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。且WST-8相较XTT和MTS化学性状更稳定, 因此实验结果相对更加稳定。此外,WST-8相较MTT、XTT,线性范围相对宽,灵敏度更高。

当细胞增殖得越多越快,则formazan产生量越多,颜色越深;反之,当内外因造成的细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。应用酶标仪测定吸光值并进行统计学计算便可以获得细胞增殖(活性)相关数据。

菲优特检测秉承“科学 · 独立 · 诚信 · 高效”的服务理念,以专业、专注的态度为您提供精确的检测技术和咨询、科研服务。

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