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Southern blot印迹杂交

Southern blot印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是:具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则特异性地杂交形成双链。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。

Southern blot印迹杂交技术包括两个主要过程:一是将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物(硝酸纤维素膜或尼龙膜)上,即印迹(blotting);二是固定于膜上的核酸与同位素标记的探针在一定的温度和离子强度下退火,即分子杂交过程。

Southern blot印迹杂交

Southern blot印迹杂交是研究DNA图谱的基本技术,在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。

 Southern blot印迹杂交服务内容 

基因组DNA的提取;

DNA限制酶消化;

电泳分离待测DNA样品;

电泳凝胶预处理,转膜;

探针合成与DIG标记,预杂交;

Southern杂交,洗膜;

放射性自显影检测;

实验结果分析及报告。

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