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细胞活性氧(ROS)检测

| ROS活性氧检测原理 

利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧的检测。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF,检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。

细胞内活性氧检测

| 实验流程 

Step1:制成单细胞悬液(组织样本)

Step2:溶血(细胞样本无需进行此步骤)

Step3:离心去上清

Step4:调整细胞密度

Step5:加入相应的荧光探针

Step6:孵育

Step7:洗涤后离心去上清

Step8:上机检测

| 实验费用 :根据客户检测需求以及实验复杂程度进行报价

| 客户注意事项 

1.标本收集与保存

>> 组织样品:新鲜组织放入液氮或-70度保存,组织不少于100mg(约绿豆大小);

>> 培养细胞:通过细胞计数取不少于2000000个细胞于EP管,加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,混匀后保存于冰箱(-70℃,避免反复冻融);

>> 血液细胞标本:以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,保存(-70℃可长期保存,避免反复冻融);

>> 血清或细胞培养液标本:离心去掉杂质后取上清入EP管,保存(以上4℃可保存15-20天,-70℃可长期保存,避免反复冻融)。

2.样本运输:可选以下任何的一种方式寄送标本

>> 组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后加冰袋运输;

>> 细胞样本也可以直接快件寄送培养瓶(密封保证不污染,培养液不漏出,细胞不要长得太满,50%左右,灌满培养液);

>> 血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保证液体不漏出,视路途远近2-3天可到达)。

| 送检与交付标准 

样品类型样品需求运输条件
组织离体后组织制成单细胞悬液,加入PBS培养基内常温运输
活细胞样本量:1*106个细胞/TEST,加入PBS培养基内常温运输
血液将血液采集在EDTA肝素钠的抗凝采血管内常温运输


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