实时荧光定量PCR是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。
实时荧光定量PCR是实验室最常用的实验,是一次由定性技术向定量技术的飞跃,运用该项技术,可以对DNA、RNA样品进行相对定量、绝对定量和定性分析。实时荧光定量PCR技术以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点,提高了普通PCR技术的特异性和准确性,成为了分子生物学研究中的重要工具。
实时荧光定量PCR技术应用范围:
1)目的基因相对表达差异分析(2-△△Ct);
2)miRNA检测;
3)基因型分析;
4)转基因生物(GMO检测);
5)细胞治疗药物组织分布检测;
实时荧光定量PCR技术优势:
1)灵敏度高,可以检测低拷贝的目的基因;
2)高精度,PCR扩增阶段包括3个阶段:指数增长期、线性增长期和平台期、96个重复指数增长期表现出高精度,而平台期则变化差异较大;
3)定量能力强,简单的流程就能得到高质量的定量数据;
4)动力学范围宽,可以精确定量9个数量级的差异;
5)速度快,节省时间和劳力,不需要电泳检测;
6)安全,使用荧光染料发光,不用EB或放射性物质,极大降低对实验人员健康的威胁;
菲优特检测利用专业实时荧光定量PCR平台,开展一系列分子生物学研究实验服务:
1)在您开始实验之前,本公司将为竭诚您提供最有效的荧光定量PCR技术服务方案;
2)mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA、SNP表达检测;
3)基因拷贝数检测(土壤中细菌、真菌、固氮菌等含量的检测和功能基因检测);
4)接受采用荧光定量PCR的检测方法针对各种检测目标的合作研发和委托研发;
实时荧光定量服务流程:
样品核酸提取、PCR引物设计与合成-引物调试(预实验)-PCR扩增检测-数据汇总初步分析
菲优特检测实时荧光定量PCR服务优势
1)免费设计实验方案;
2)严格按照SOP进行实验,数据真实准确;
3)丰富的引物设计经验,保证引物特异性;
4)完善的样本管理流程,保证客户样本质量;
5)严格的质控标准,保证提取DNA/RNA质量;
6)QPCR检测时,保证每个样本2~3个平行对照,确保实验结果准确;
7)实验结束后3天内,反馈客户检测数据及报告。