活体动物体内光学成像主要采用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶基因(Luciferase)标记细胞或DNA,而荧光技术则采用绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白等荧光报告基因和FITC、Cy5、Cy7等荧光素及量子点(quantumdot,QD)进行标记。
小动物活体成像技术是采用高灵敏度制冷CCD配合特制的成像暗箱和图像处理软件,使得可以直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。通过对同一组实验对象在不同时间点进行记录,跟踪统一观察目标(标记细胞及基因)的移动及变化。操作简单、所得结果直观、灵敏度高,已广泛应用于生命科学、医学研究及药物开发等发面。
活体荧光成像技术标记方法
1. 荧光蛋白标记:适用于标记细胞、病毒、基因等,通常使用的是GFP、EGFP、RFP(DsRed)等;
2. 荧光染料标记:常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7,可以标记抗体、多肽、小分子药物等;
3.量子点标记:主要应用在活细胞实时动态荧光观察与成像,可以在长达数天内进行细胞的分化和世系观察,以及细胞间、细胞内及细胞器间的各种相互作用的原位实时动态示踪。不但如此,量子点还可以标记在其他需要研究的物质上,如药物、特定的生物分子等,示踪其活动及作用。
实验流程
1.制作动物模型
2.细胞标记或动物标记
3.活体成像
4.数据处理
应用领域
肿瘤学
建立肿瘤模型,通过活体成像技术可以测量肿瘤的生长、转移以及对药物的反应,使肿瘤学更接近临床的发病的微观环境。相比传统方法,不仅灵敏度提高(检测到微小肿瘤病灶),而且适合于肿瘤体内生长的定量分析,避免由于宰杀老鼠而造成的组间差异。
药物研究
通过活体成像技术可研究与药物代谢有关的基因,药物作用通路以及药物的靶向脏器和体内分布规律。
实验交付
客户提供:
1.客户需自行提供活体成像实验涉及的动物、试剂等(如无可由本公司代购)
2.动物实验的具体的要求和注意事项;
3.提供荧光素酶基因(Luciferas)或者荧光物质的具体信息。
我们提供:
实验记录报告,含所需试剂耗材、仪器设备、操作过程。